广 · 告
1.1 材料
1.1.1 菌种
试验菌株选择水产养殖鱼类的常见致病菌，。
G4 柱状曲挠杆菌 Flexibacter calumnaris
56-12-10 荧光假单胞菌 Pseudomonas fluorescens
ST 78-3-3 嗜水气单胞菌 A.hydrophila hydrophila
58-20-9 副溶血弧菌 Vibrio parahem olyticus
BYK00056-11-24 溶藻弧菌 Vibrio alginolyticus
1.1.2 试验药品
试验药品"过硫酸氢钾"本试验所使用的过硫酸氢钾由连云港永荣生物科技有限公司提供，具体产品信息见表1。
表1 过硫酸氢钾产品信息
编号 | 产品名称或公司名字 | 有效成分含量（%） | 剂型 |
S1 | 德国某公司 | 50% | 粉剂 |
S2 | 福建某公司 | 50% | 粉剂 |
S3 | 美国某公司 | 50% | 粉剂 |
S4 | 上海某公司 | 50% | 粉剂 |
S5 | 浙江某公司 | 50% | 粉剂 |
S6 | 浙江某公司 | 50% | 颗粒 |
S7 | 福建某公司 | 50% | 颗粒 |
S8 | 上海某公司 | 50% | 颗粒 |
S9 | 连云港永荣 | 50% | 片剂 |
S10 | 连云港永荣 | 50% | 粉剂 |
1.1.3 培养基
选用肉汁胨培养基：蛋白胨10g，牛肉膏5g，NaCl 5g，H2O 1000mL，pH 7.2～7.4，1.05 kp灭菌20min。
1.2 方法
1.2.1 菌悬液的制备
将各菌株接种到已灭菌的培养基上，培养24-48h后刮取菌苔，置于无菌生理盐水中摇匀，离心2次(4500r/min，每次20min)，收集沉淀，重悬于无菌生理盐水中，参照麦氏比浊管将菌液稀释到约107 CFU/mL。
1.2.2 药液配制
过硫酸氢钾用无菌水稀释1000mg/L备用。
1.2.3 抗菌效果试验
2.1 过硫酸氢钾对不同病原菌的敏感性
表1 不同细菌对过硫酸氢钾的敏感性
药物浓度（mg/L） | 柱状曲挠杆菌 | 荧光假单胞菌 | 嗜水气单胞菌 | 副溶血弧菌 | 溶藻弧菌 | ||||||
抑菌圈直径 | 敏感性 | 抑菌圈直径 | 敏感性 | 抑菌圈直径 | 敏感性 | 抑菌圈直径 | 敏感性 | 抑菌圈直径 | 敏感性 | ||
S1 | 7.1 | 28.7 | S | 22.6 | S | 23.4 | S | 17.6 | S | 14.5 | S |
5.6 | 20.7 | S | 18.2 | S | 18.3 | S | 12.3 | S | 8.7 | S | |
4.2 | 15.8 | S | 14.3 | S | 12.9 | S | 8.4 | R | - | R | |
3.1 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S2 | 6.0 | 25.1 | S | 26.2 | S | 21.4 | S | 22.3 | S | 19.8 | S |
4.7 | 22.4 | S | 21.3 | S | 18.5 | S | 19.8 | S | 15.6 | S | |
3.3 | 16.4 | S | 15.7 | S | 16.3 | S | 14.6 | S | 12.8 | S | |
2.5 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S3 | 7.0 | 29.7 | S | 25.2 | S | 21.2 | S | 19.7 | S | 16.7 | S |
5.4 | 26.4 | S | 22.1 | S | 17.3 | S | 12.8 | S | 13.4 | S | |
4.3 | 21.0 | S | 18.0 | S | 13.7 | S | 8.5 | R | 9.1 | R | |
3.4 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S4 | 7.5 | 28.9 | S | 23.5 | S | 19.7 | S | 16.5 | S | 17.4 | S |
6.3 | 24.5 | S | 15.1 | S | 14.5 | S | 11.9 | S | 13.7 | S | |
5.1 | - | R | - | R | 8.7 | R | - | R | - | R | |
4.0 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S5 | 6.4 | 23.8 | S | 24.5 | S | 23.4 | S | 16.4 | S | 17.5 | S |
5.3 | 21.4 | S | 20.6 | S | 18.7 | S | 12.7 | S | 13.6 | S | |
4.3 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
3.4 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S6 | 6.4 | 23.1 | S | 22.8 | S | 20.9 | S | 21.4 | S | 21.8 | S |
5.3 | 18.5 | S | 17.6 | S | 17.4 | S | 13.8 | S | 13.1 | S | |
4.3 | 13.4 | S | 12.3 | S | 13.5 | S | - | R | - | R | |
3.4 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S7 | 6.0 | 20.5 | S | 22.7 | S | 20.7 | S | 21.8 | S | 20.4 | S |
4.7 | 17.4 | S | 17.8 | S | 18.3 | S | 17.6 | S | 17.1 | S | |
3.3 | 12.8 | S | 14.6 | S | 13.4 | S | 11.8 | S | 12.4 | S | |
2.5 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S8 | 7.5 | 21.5 | S | 25.4 | S | 23.7 | S | 18.7 | S | 17.8 | S |
6.3 | 16.7 | S | 18.7 | S | 17.6 | S | 13.2 | S | 11.5 | S | |
5.1 | 13.5 | S | 12.5 | S | 12.5 | S | - | R | - | R | |
4.0 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S9 | 6.0 | 22.8 | S | 23.7 | S | 18.9 | S | 20.7 | S | 18.3 | S |
4.7 | 15.9 | S | 20.5 | S | 17.4 | S | 16.7 | S | 16.8 | S | |
3.3 | 8.4 | R | 17.5 | S | 13.5 | S | 12.5 | S | 13.5 | S | |
2.5 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
S10 | 6.0 | 20.4 | S | 18.7 | S | 22.5 | S | 23.7 | S | 28.4 | S |
4.7 | 17.6 | S | 14.6 | S | 20.4 | S | 18.0 | S | 22.0 | S | |
3.3 | 11.5 | S | 13.2 | S | 13.8 | S | 13.1 | S | 14.8 | S | |
2.5 | - | R | - | R | - | R | - | R | - | R | |
注：S-敏感;R-不敏感。
2.2对几株细菌的最小抑菌浓度(MIC)试验
过硫酸氢钾对5株细菌的抑菌试验结果。“+/-”表示，2个平行组中1个为“+”、1个为“-”;“+”或“-”表示，2个平行组的结果相同，同为“+”或“-”，“+”表示有细菌生长，而“-”表示无细菌生长。每种病原菌的每个浓度梯度均设1个不加药物的阴性对照，以便于区别浑浊是由细菌繁殖造成还是药物本身产生的浑浊，抑或细菌由于其它原因造成了死亡(表2)。
表2 过硫酸氢钾对几株细菌的杀灭效果 (mg / L)
药物浓度（mg / L） | 柱状曲挠杆菌 | 荧光假单胞菌 | 嗜水气单胞菌 | 副溶血弧菌 | 溶藻弧菌 | ||
S1 | 7.1 | +/- | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/- | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | + | + | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S2 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | - | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | - | - | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S3 | 7.1 | +/- | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/- | - | - | - | ||
4.5 | - | - | +/- | +/- | +/- | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S4 | 7.1 | +/- | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/- | - | - | - | ||
4.5 | + | + | - | + | + | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S5 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/－ | - | - | - | ||
4.5 | + | + | + | + | + | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S6 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/- | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | + | + | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S7 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | +/- | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | - | - | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S8 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | +/- | - | - | - | - | ||
5.2 | - | - | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | + | + | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S9 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | - | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | - | - | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
S10 | 7.1 | - | - | - | - | - | |
6.1 | - | - | - | - | - | ||
5.2 | - | - | - | - | - | ||
4.5 | - | - | - | - | - | ||
3.2 | + | + | + | + | + | ||
过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MIC值见表3。
表3 过硫酸氢钾对几株细菌的最小抑菌浓度(MIC) (mg / L)
编号 | 柱状曲挠杆菌 | 荧光假单胞菌 | 嗜水气单胞菌 | 副溶血弧菌 | 溶藻弧菌 |
S1 | 3.7 | 4.2 | 3.8 | 4.9 | 5.1 |
S2 | 3.1 | 3.5 | 3.8 | 4.0 | 4.2 |
S3 | 3.8 | 4.3 | 4.5 | 4.8 | 5.1 |
S4 | 5.1 | 5.8 | 3.6 | 4.8 | 4.6 |
S5 | 4.7 | 5.7 | 4.8 | 4.7 | 4.6 |
S6 | 3.4 | 4.8 | 3.6 | 4.9 | 5.2 |
S7 | 3.6 | 4.9 | 3.5 | 3.8 | 3.4 |
S8 | 4.8 | 3.4 | 3.8 | 5.6 | 5.7 |
S9 | 3.5 | 3.7 | 3.6 | 3.8 | 3.7 |
S10 | 3.3 | 3.4 | 3.2 | 3.8 | 4.0 |
2.3对几株细菌的最小抑菌浓度(MBC)试验
过硫酸氢钾对柱状曲挠杆菌等的MBC值见表4。
表4 过硫酸氢钾对几株细菌的最小杀菌浓度(MBC) (mg / L)
编号 | 柱状曲挠杆菌 | 荧光假单胞菌 | 嗜水气单胞菌 | 副溶血弧菌 | 溶藻弧菌 |
S1 | 5.6 | 6.3 | 5.7 | 7.4 | 7.7 |
S2 | 4.5 | 5.3 | 5.7 | 6.0 | 6.1 |
S3 | 5.7 | 6.5 | 6.8 | 7.5 | 7.7 |
S4 | 7.7 | 8.7 | 5.4 | 7.2 | 6.4 |
S5 | 7.1 | 8.6 | 7.2 | 7.1 | 6.9 |
S6 | 5.1 | 7.1 | 5.8 | 7.4 | 7.5 |
S7 | 5.4 | 7.4 | 5.3 | 5.7 | 5.1 |
S8 | 7.2 | 5.1 | 5.7 | 8.3 | 8.0 |
S9 | 5.3 | 5.6 | 5.4 | 5.7 | 5.6 |
S10 | 5.0 | 5.1 | 4.8 | 5.7 | 6.0 |
过硫酸氢钾对水产动物常见病原菌有较强的抗菌力，过硫酸氢钾对试验的5种病原菌的MIC为3.1~5.7mg/L之间，MBC为4.5~8.3 mg/L之间。
此试验数据表明连云港永荣生物科技有限公司的50%片剂及粉剂在抑菌圈及最小杀菌、抑菌浓度上都表现了极好的效果，这也表明了复合过硫酸氢钾配方的重要性。
连云港永荣生物科技有限公司创始人2002年就将单过硫引进了中国，到现在15年的时间也只是专攻了此类产品，虽然进入水产行业时间不长，但产品的配方非常有优势，试验数据也证明了这一点。永荣生物将凭本心大力推广真品，更希望能和水产同行一起为广大养殖朋友带来福音。
连云港永荣生物科技有限公司联系人：赵经理(15821078956)，欢迎致电垂询。
1、关于单过硫酸氢钾复合盐发展史，你都知道多少
2、市场上有众多假冒伪劣的过硫酸氢钾，多种检测方法汇总为养殖户作出判断
END
来源：鱼类繁殖与健康养殖中心，西南大学（荣昌校区），重庆 402460
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